Tipo de muestra
que puede utilizar

Muestra de biopsia tumoral y plasma

Para lograr un exitosa prueba de detección de mutaciones EGFR, la cantidad suficiente de células tumorales es requerida para asegurar una adecuada concentración de ADN tumoral extraído para el análisis.1-3 Los dos principales tipos de muestras utilizados para la evaluación de la prueba de detección de mutaciones EGFR es la biopsia tumoral y el ADN circulante de tumor (ctDNA) obtenido de sangre (plasma).

PlasmaVsTissue

Muestra de biopsia tumoral

En el diagnóstico de CPCNP avanzado, una biopsia tumoral es el tipo de muestra preferida para detectar las mutaciones de EGFR. En la progresión de la enfermedad posterior a un tratamiento con EGFR-TKI como afatinib, erlotinib y gefitinb, una biopsia tumoral es recomendada.9

Es importante seguir las directrices para obtener, fijar y manejar muestras de biopsias tumorales y cuando se realiza la prueba de detección de mutaciones EGFR.1,10,11

  • Los laboratorios deben seguir buenas prácticas, estar validados para desarrollar una prueba de detección de mutaciones EGFR e implementar un esquema de aseguramiento de la calidad.
  • El lugar de la biopsia debe ser seleccionado por el médico que colectará la biopsia y en general, la biopsia debe ser tomada del más apropiado o fácil acceso al sitio de metástasis o sitio tumoral.
  • Varias técnicas de biopsia bien establecidas pueden ser usadas para obtener una alta calidad de muestras tumorales; biopsia con aguja, biopsia transbronquial, endobronquial, biopsia con aguja guiada por tomografía computarizada, mediastinoscopía, asistida por video, cirugía y toracotomía toráxica.
  • Se recomienda que las muestras se fijen en formalina, parafina, congelen o fijen en alcohol. Una fijación óptima se da en 10% de buffer neutro de formalina por 6 – 12 horas para muestra pequeñas y 8 – 18 horas para muestras quirúrgicas grandes.
  • Las células cancerígenas contienen una cantidad y calidad de ADN de muestra que debe ser determinada, y la mínima proporción y número de células cancerígenas necesarias para la detección de la mutación durante la validación.

Muestras de ctDNA (plasma)

En muchos pacientes con CPCNP avanzado, el ctDNA está presente en la sangre.13 Cuando la biopsia tumoral no está disponible, la muestra de ctDNA de sangre (plasma) provee una alternativa para detectar las mutaciones EGFR.12

Basado en los resultados del estudio fase IV, IRESSA Follow-up Measure (IFUM; gefitinib (IRESSA) fue el primer EGFR-TKI que permitió el uso de ctDNA obtenido de muestras de sangre para ser utilizado en la detección de las mutaciones EGFR al diagnóstico en los pacientes donde la muestra tumoral no esta disponible.3,14

En la progresión de la enfermedad, luego de un tratamiento con EGFR-TKI (ejemplo: afatinib, erlotinib o gefitinib), puede ser mas retador el obtener una biopsia tumoral que en el diagnóstico. Una muestra de ctDNA obtenida de sangre (plasma) ofrece alternativa más rápida y menos invasiva para detectar las mutaciones EGFR.

La fase II del estudio AURA 2, evalúa la actividad y seguridad de osimertinib en pacientes que han progresado luego de un tratamiento con un EGFR-TKI aprobado. Este estudio apoya la necesidad de una biopsia al momento que la enfermedad progresó. 15

Se debe evitar la coagulación de sangre y lisis celular para la prueba ctDNA, los tubos de EDTA pueden ser utilizados para las muestras de sangre para ser procesados rápidamente sin embargo, los tubos de estabilización proveen una alternativa cuando esto no es posible (ejemplo: Streck Cell-Free DNA blood collection tubes, Roche Cell-Free DNA collection tubes, PAXgene Blood ccf-DNA Tubes.15-18

Por favor considere: los tubos de heparina no deben ser utilizados, estos interfieren con el desarrollo de las aplicaciones en PCR.17

EGFR Plasma